开云体育入口第十二章(3) 水果作物的组织培养;本章内容提要： 一、草莓微茎尖培养 二、葡萄的组织培养 三、无花果的组织培养 ;本章目的和要求： （1）掌握草莓微茎尖培养的大致过程， 了解鉴定草莓无毒病苗的方法； （2）掌握葡萄的组织培养过程。 （3）掌握无花果的组织培养;陈传红 制作;一、形态特性和生物学特性 草莓为重要的浆果植物，栽培分布很广，其总产量在浆果类中仅次于葡萄，居世界第二位。草莓果实柔软多汁，含丰富的糖、酸、矿物质，维生素等。草莓可鲜食，也可加工成果酱，果酒等。其颜色鲜艳，是良好的配餐食品。;1. 形态特性 草莓属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，须根系，在土壤中分布较浅。 草莓的茎呈短缩状，分地上和地下部分，地上短缩茎节间极短，节密集，其上密集轮生叶片，叶腋部位着生腋芽。 匍匐茎是草莓的特殊地上茎，是其营养繁殖器官，茎细，节间长，一般座果后期发生。;2. 生物学特性 草莓根系在土壤温度达到2℃时开始活动，在10℃时开始形成新根，根系生长的最适温度为15~20℃，秋季温度降低到7~8℃时生长减弱。 春季气温达5℃时植株开始萌芽，茎叶开始生长。草莓的根系分布较浅，加上植株矮小，叶片较大，因此蒸发量大。 在整个生长季节，叶片几乎都在不断地进行老叶死亡、新叶发生的过程，叶片更新频繁。;二、草莓脱毒苗的培养 1.热处理脱毒 将草莓植株在40~41℃温度下处理4~6周，然后取微茎尖培养。 2.微茎尖脱毒 初代培养 ： 外植体消毒：匍匐茎上的顶芽，用自来水流水冲洗2～4h，剥去外层叶片，在无菌条件下，用0.5%次氯酸钠溶液表面消毒5min，并不停地搅动。 于超静工作台上剥取茎尖并接种。;培养基：MS + BA 0.25 + NAA 0.25 或 MS + BA 0.5 + NAA 0.2中。 培养条件：22～25℃，光照16～18h，3000lx。经2～3个月的培养，可生长分化出芽丛。 注意！在低温和短日照下，茎尖有可能进入休眠，所以较高的温度和充足的光照时间必须保证。;(3) 生根培养 生根培养基：1/2MS+IBA0.1。 (4)驯化、移栽： 用镊子把草莓苗从试管瓶中取出，洗掉根系附带琼脂培养基。事先备好8×8cm或6×6cm的塑料营养???，内装等量的腐殖土和河砂。 栽前压实，浇透水，用竹签在钵中央打一小孔，将试管苗插入其中，压实苗基部周围基质，栽后轻浇薄水，以利幼苗基部和基质密合。 要“深栽浅埋”，即根要深栽、根茎略高于地面。;3．花药培养脱毒 花药培养操作简单，因经愈伤组织途径，再分化得到的即为无病毒苗，所以可免去病毒鉴定工作。;培养基: MS + 2,4–D 0.4 + IAA 2.0。 培养条件：24～26℃,光照10h/d，1500lx, 20d后可产生乳白色的愈伤组织。;四、草莓无病毒苗的鉴定 草莓花药培养得到的为无病毒苗，而用生长点培养得到的植株，则必须经过病毒鉴定，确定其不带病毒，才可以大量繁殖，用于生产。 ;;指示植物;嫁接后的植物;五、草莓无病毒苗的繁殖和利用 1. 防止蚜虫的危害 无病毒苗的繁殖重要的是要防止无病毒苗再度污染。 草莓病毒主要是蚜虫传播的，故要搞好防蚜虫工作。 草莓病毒通过蚜虫吸吮汁液而得到传播，短时间即可完成。 防治时可使用马拉松乳剂，氧化乐果乳剂等接触杀虫剂，防治期5～6月，9～10月，特别是9～10月一次，可防止蚜虫的越冬。;2．繁殖程序及措施 繁殖程序可分五步： 脱病毒鉴定生产出无毒苗、原种种苗培养、原种种苗繁殖、良种种苗繁殖、生产用苗繁殖和栽培苗繁殖。 前四步在隔离室中进行，后一步在露地进行。 为提高无病毒母株的繁殖株数可采用赤霉素处理和摘蕾的方法，在5月上旬和6月上旬分两次进行。 摘蕾可减轻母株的营养负担，促进匍匐茎的大量发生，田间地每一株可繁殖150~200株。;第二节 葡萄的组织培养;组培苗;一、形态特征和生物学特性 果品中，葡萄产量及栽培面积在全世界一直居于首位。其果实除作为鲜果食用外，主要用于酿酒，还可制成葡萄汁、葡萄干和罐头等加工品。 形态特性：葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄原产于温带地区。 生物学习性：深根性作物，根系垂直分布、发达，根系抗寒力很弱，大部分欧洲种葡萄的根系在－5～－7℃时即受冻，某些美洲种能忍受 －11～－12℃左右的低温。;二、葡萄的组织培养 1.选材、外植体消毒及接种 葡萄新梢顶端取1～2㎝的茎尖，除去幼叶后在5%次氯酸钠溶液中浸泡2～3min，消毒灭菌，以后用无菌水冲洗3次，再在0.1%升汞溶液中浸泡约2min，再用无菌水冲洗4次。在无菌条件下分离出约2㎜长的茎尖，接种到培养基上。;3.茎尖的分化 葡萄1～2㎜茎尖接种后成活率较高，接种成活的茎尖1个月左右开始分化幼叶和侧芽，2个月左右，由于侧芽的不断增生，形成芽???。 由于不同品种对BA和NAA的反应不同，故生长有明显区别，如：巨峰、大粒白香蕉、赤霞珠等品种，由于顶端优势强，侧芽生长势弱，故增殖率低，但成苗率高；白羽、贵人香等大多数品种侧芽分生能力强，可在幼茎上多次分枝，故成苗率低。;4.茎尖苗的生长 在茎尖分化培养中产生的成苗率低和成苗困难，密集生长的芽丛，可将分化培养基中的BA浓度减低至0.5， 同时添加GA30.2，则经1个月的培养，就可长成2～3㎝高的幼茎。 此外黑暗处理对幼茎的伸成，提高成苗率，也有明显的效果。;5、生根与移栽 切取2～3cm的茎尖苗，接种到MS + IAA 0.4 + NAA 0.05 培养基中，进行生根培养 1～2周后幼苗开始生根，1个月形成完整的根系，同时具备5～6片新叶。 移栽时洗去根上的培养基，栽到蛭石基质内，使根系具有良好的通气条件，盖上塑料薄膜，经7～10d锻炼适应后可去掉，移栽成活率在90%左右。;提高葡萄试管苗移栽成活率要注意： 1、幼苗生长要健壮； 2、要保持空气湿度； 3、根际通气良好； 4、要尽量减少杂菌污染； 5、浇灌的溶液浓度不能过高。;第三节 无花果的组织培养;新疆无花果;无花果树;一 、特性和生物学习性 1、形态特征：无花果为桑科、无花果属的落小乔木，是一种亚热带果树。花单性，隐于囊状总花花托内，果实由总花托和其他花器官组成，呈扁圆状或卵形，成熟后顶端开裂，肉质柔软，味甜。具有观赏和药用兼备的价值。;二．无花果的茎段培养 外植体消毒：将采来的健壮的嫩茎削去大叶片，留下带腋芽的茎段，切成3～4cm长的小段，用流水冲洗3h ,以清除表面污染物，然后放入75%酒精中，再用0.1%氯化汞消毒7～10分钟，最后用无菌水冲洗4～5次，在无菌条件下将茎段横切成长约1 cm接种。 培养基：MS+BA0.5～1.0长芽中。 培养：8天后外植体接触培养基的一端切口周围长出嫩绿色、质地紧密的愈伤组织，同时腋芽展开，愈伤组织和腋芽的诱导率均为100%。 ;丛生芽增殖培养基：MS + BA 1～2 + NAA 0.1～0.2。 腋芽萌生成绿色簇生状，每个腋芽上可生出15~28个芽丛，逐渐长成苗丛。 当一部分芽长高至2～3cm时，切取单苗转移到生根培养基上MS+NAA0.2上，11天左右开始生根。 20d左右长成具有根系的完整植株，这时可取出移栽，成活率达98%。;作业：

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